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多種真菌毒素專用柱液質質法 一步通過法SPE柱凈化谷物類

更新時間:2022-08-25點擊次數:3552

真菌毒素為真菌增殖時產生的次生有毒代謝產物。

真菌的孢子能透過空氣、風力、水流和動物等方式來傳播。只要有少量蛋白質、淀粉、脂質及水份,就是適合真菌生長的環境,因此谷物、果實類、玉米及花生都是真菌主要生長處。

 

黃曲毒素具有潛在性的肝毒害(hepatoxin)及致癌性,其性質穩定,因此真菌毒素易出現在食物鏈中;除了直接食用被真菌毒素污染的食物,也可能透過飼料讓動物生病。

 

真菌毒素污染食品和飼料對于全球性作物及動物養殖業影響很大。

據估計每年約25%農作物受到不同程度的真菌毒素污染,以美國和加拿大而言,真菌毒素造成飼料業和家畜業每年損失約50億美金(IFST, 2006)

 

本篇應用以FaTEx-gen快速凈化萃取凈化柱進行前處理,使用LC-MS/MS分析11種真菌毒素的含量, 包含黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類(伏馬毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)、玉米赤霉毒素等),建立一套快速準確的檢測方法,利于維護飼料質量及相關作物食品安全。

 

搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱及Agilent 6470液相層析串聯式質譜儀,檢測谷物、黃豆及花生等基質。

 

樣品制備流程如下:

 

樣品秤樣后加標靜置,加入12mL萃取溶液,高速震蕩機震蕩30分鐘,于3500rpm離心5分鐘,得到上清液。

取一定量的上清液通過FaTEx-gen SPE柱凈化,氮吹回溶后上機到LC-MSMS分析。

 

分析結果如表三所示,回收率落在81.9~112.7%范圍內,CV%皆小于20,顯示此為一快速、穩定之檢驗方法。

 

前處理步驟和儀器分析條件,歡迎索取。

產品信息:FaTEx-gen  真菌毒素專用SPE柱       巨研科技     50/

 

2、霉菌毒素11項藥劑之添加濃度

分析物

中文名稱 

添加濃度(ng/g)

Aflatoxin B1

黃曲霉素 B1

2.5

Aflatoxin B2

黃曲霉素 B2

2.5

Aflatoxin G1

黃曲霉素 G1

2.5

Aflatoxin G2

黃曲霉素 G2

2.5

Ochratoxin A

赭曲霉毒素 A

2.5

T-2 toxin

T-2毒素

5

HT-2 toxin

HT-2毒素

5

Deoxynivalenol

嘔吐毒素

25

Zearalenone

玉米赤霉烯酮

25

Fumonisin B1

伏馬毒素 B1

100

Fumonisin B2

伏馬毒素 B2

100

 

3、谷類樣品中11項霉菌毒素之回收率和變異系數

中文名稱

英文名稱

黃豆

花生

CV%

R%

CV%

R%

黃曲霉素 B1

Aflatoxin B1

2.3

108.5

9.0

97.5

黃曲霉素 B2

Aflatoxin B2

3.7

105.0

2.4

98.2

黃曲霉素 G1

Aflatoxin G1

2.6

105.4

2.0

102.9

黃曲霉素 G2

Aflatoxin G2

3.4

107.4

4.0

103.0

赭曲霉毒素 A

Deoxynivalenol

4.8

100.3

1.6

103.9

T-2毒素

Fumonisin B1

8.1

90.3

6.1

89.0

HT-2毒素

Fumonisin B2

13.5

81.9

5.3

96.7

嘔吐毒素

HT-2 toxin

9.1

109.7

13.4

100.4

玉米赤霉烯酮

Ochratoxin A

2.8

101.9

3.8

106.0

伏馬毒素 B1

T-2 toxin

5.9

110.1

5.6

112.7

伏馬毒素 B2

Zearalenone

8.1

108.6

5.0

94.4

*重復性,n=3

 

結論:

1、本篇以FaTEx-gen萃取凈化套組搭配ZORBAX Eclipse Plus C18管柱于液相串聯質譜之分析方法,檢測谷類樣品(黃豆及花生)之多重霉菌毒素(黃曲毒素類、赭曲毒素A及鐮孢菌毒素類)共11項,每次分析時間13分鐘,為快速準確的檢驗方法。

2、 FaTEx-gen萃取凈化套組可針對復雜檢體基質加強凈化,降低基質干擾。

3、 FaTEx-gen套組檢測添加多重毒素標準品之谷類樣品(添加濃度:黃曲霉素B1 Aflatoxin B1,黃曲霉素B2  Aflatoxin B2,  黃曲霉素G1  Aflatoxin G1,  黃曲霉素G2 Aflatoxin G2,赭曲霉毒素 A  Ochratoxin A2.5 ng/gT-2 toxin, HT-2 toxin5 ng/g;嘔吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤霉烯酮 Zearalenone25 ng/g;伏馬毒素 B1  Fumonisin B1,伏馬毒素 B2  Fumonisin B2100 ng/g)回收率落在81.9~112.7%范圍內,變異系數皆小于20,為穩定之檢驗方法。 

 

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